影片延续了上一集的主线剧情，讲述了一个名叫“黑蛇”新娘(乌玛瑟曼饰)——的职业刺客杀死敌人的复仇传奇。致命毒蛇暗杀队的老板比尔和其他几名职业杀手残忍地杀死了所有的婚礼宾客，然后离开，留下了中枪陷入昏迷的新娘。四年后，已经变成植物人的新娘在医院意外醒来，开始了她千里迢迢的彻底而残酷的追求。杀死世界上曾经的搭档“水腹蛇”和“眼镜蛇”后，新娘的死亡名单上只剩下三个人：——“加州山蛇”、巴德和比尔。在一个又一个绞索的绞索尽头，等待“黑蛇”的将是她的终极任务，那场命运攸关的决斗“杀死比尔”